一种防止辣椒落花、落果的液体肥料及其制备方法与流程

文档序号:18080802发布日期:2019-07-03 05:13
本发明属于液体肥料的
技术领域
,更具体地,涉及一种防止辣椒落花、落果的液体肥料及其制备方法。
背景技术
:辣椒为一年或有限多年生草本植物,果实通常呈圆锥形或长圆形,未成熟时呈绿色,成熟后变成鲜红色、绿色或紫色,以红色最为常见。辣椒的果实因果皮含有辣椒素而有辣味,能增进食欲。辣椒中维生素C的含量在蔬菜中居第一位,原产墨西哥,明朝末年传入中国。辣椒原产于中拉丁美洲热带地区,原产国是墨西哥。在中国主要分布在四川,贵州,湖南,云南,陕西、河南(淅川县)、河北省鸡泽县和内蒙古托克托县。链霉菌属(streptomyces)是放线菌目的一属。基内菌丝不断裂,气生菌丝通常发育良好,形成长(有时短)的孢子丝。孢子不能运动,外鞘上常有疣、刺或毛发等状饰物。链霉菌广泛存在于土壤中,是丝状的革兰氏阳性细菌,主要通过孢子繁殖,绝大多数链霉菌对人体无害。链霉菌是产生各种抗生素的主要来源,源于链霉菌的抗生素包括红霉素、四环素、链霉素、氯霉素、新霉素、制霉菌素、卡那霉素、放线菌酮和两性霉素等,因此,对于链霉菌的已有研究主要集中于菌株产生抗菌活性物质的能力和大小等方面。辣椒种植培育过程中经常出现落花、落果的现象,严重影响了辣椒的产量以及果实质量,为了减少栽培过程中植株体缺少营养贮存,出现抽落花、落果等现象,应加强种植养分的补充,栽培过程中的花果发育加直接影响果实品质及产量。技术实现要素:本发明要解决的技术问题是克服现有辣椒栽培过程中落花、落果,提供一种防止辣椒落花、落果的液体肥料及其制备方法在辣椒培育过程中的应用。本发明上述目的通过以下技术方案实现:一种防止辣椒落花、落果的液体肥料,由以下重量份的物质组成:活性液体肥基底制剂1000份、芸苔素0.01~3份、赤霉素0.01~5份、壳寡糖0.01~3份、硝酸铵钙68~85份、氨基酸1~12份、磷酸二氢钾15~26份、氯化钾40~52份、硫酸镁9~21份、硼砂1~10份、微量元素2~12份;所述液体肥料中总氮含量≥2.5mg/g,氨基氮含量≥0.4mg/g,有机质含量≥130g/L。所述活性液体肥基底制剂由链霉菌属菌株“TY-001#”发酵得到;链霉菌属菌株“TY-001#”的培养基为:取大豆进行浸泡或取豆粕进行预发酵后,进行打浆、过滤;然后往滤液中加入糖后,加水定容至培养基中糖的浓度≥100g/L,pH为7.4~7.6;所述链霉菌属菌株“TY-001#”于2017年3月24日保藏于广东省微生物菌种保藏中心,分类命名为Streptomyces.,其保藏编号为GDMCCNo.:60152,保藏地址是中国广东省广州市先烈中路100号省微生物所实验楼五楼。优选地,所述液体肥料由以下物质组成:活性液体肥基底制剂1000份、芸苔素0.1~1份、赤霉素0.1~3份、壳寡糖0.1~1份、硝酸铵钙78~83份、氨基酸3~9份、磷酸二氢钾18~23份、氯化钾42~50份、硫酸镁11~18份、硼砂2~5份、微量元素5~10份;所述液体肥料中总氮含量≥2.5mg/g,氨基氮含量≥0.4mg/g,有机质含量为≥130g/L。优选地,所述液体肥料由以下物质组成:活性液体肥基底制剂1000份、芸苔素0.3份、赤霉素1份、壳寡糖0.8份、硝酸铵钙81份、氨基酸6份、磷酸二氢钾21份、氯化钾45份、硫酸镁15份、硼砂3份、微量元素8份;所述液体肥料中总氮含量≥2.5mg/g,氨基氮含量≥0.4mg/g,有机质含量为≥130g/L。进一步地,所述液体肥料中N、P、K的重量比为4~7:1:5~8,优选5:1:6。进一步地,所述钙、镁、磷重量之比为3~7:1:1~3,优选15:3:5。进一步地,所述微量元素含有锌、铜、钼、铁、硫、锰中的一种或几种。进一步地,所述微量元素来自螯合锌、碳酸锌、螯合铁、碳酸亚铁、螯合钼、钼酸钠、螯合铜、无水硫酸铜、硫酸锰中的一种或几种。一种所述防止辣椒落花、落果的液体肥料的制备方法,包括以下步骤:S1.制备培养基:取大豆进行浸泡或取豆粕进行预发酵后,进行打浆、过滤;然后往滤液中加入糖后,加水定容至培养基中糖的浓度≥100g/L,pH为7.4~7.6;S2.接种:取链霉菌属菌株“TY-001#”的液体菌种,接种到培养基中,搅拌均匀;S3.发酵:在发酵过程中往培养基中持续通入氧气,于20~28℃下持续发酵7~8天后,得到发酵液;S4.终止发酵:将发酵液灌装密闭静置15天,得到所述活性液体肥基底制剂;S5.液体肥料的配置:往所述活性液体肥基底制剂添加芸苔素、赤霉素、壳寡糖、硝酸铵钙、氨基酸、磷酸二氢钾、氯化钾、硫酸镁、硼砂、微量元素得到所述液体肥料。进一步地,所述预发酵的步骤为:S11.往豆粕中加水,并搅拌充分均匀,直至豆粕用手紧捏达到滴水成线的状态即可;S12.用薄膜覆盖在豆粕表面,不留缝隙,计时开始预发酵过程;S13.预发酵时间为3~5天;开始发酵2天后,将温度计插入豆粕深处,发酵原料内部温度≥40℃时,将预发酵豆粕里外翻转一次,继续发酵2~3天。优选地,所述步骤S1中加水定容至培养基中糖的浓度为100g/L。优选地,所述活性液体肥基底制剂存放15天后其氨基态氮含量≥4.8g/L。优选地,所述液体菌种中每毫升有2亿个活菌;所述液体菌种与培养基的比例为165g:250L。优选地,链霉菌属菌株“TY-001#”的形态特征为:菌落呈圆形,乳白色,边缘光滑,表明有炼乳状光泽;孢子革兰氏染色呈阳性。一种所述链霉菌属菌株(Streptomyces)的培养方法,包括以下步骤:Y1.取链霉菌属菌株“TY-001#”划线于固体培养基上,25~30℃倒置活化培养3~7天,制得活化后菌株;Y2.取步骤S1制得的活化后菌株接种至液体培养基中,在温度为25~30℃、转数为150~220转/分钟的条件下,摇床培养3~7天,得到菌液。优选地,所述液体培养基每升组分如下:取大豆、豆粕100g磨成豆浆过滤,弃渣;白砂糖、蔗糖或红糖100g;水定容至1升,pH为7.4~7.6。优选地,所述液体培养基每升组分如下:牛肉膏3.0g、蛋白胨10.0g、氯化钠5.0g,水定容至1升,pH为7.4~7.6。优选地,所述固体培养基每升组分如下:牛肉膏3.0g、蛋白胨10.0g、氯化钠5.0g、琼脂15~25g,水定容至1升,pH为7.4~7.6。与现有技术相比,本发明具有以下有益效果:本发明的液体肥料能够有效促进辣椒开花结果,有效解决了辣椒树落花、落果的问题,保障辣椒果实膨大饱满,可显著提高产量。本发明的液体肥料对辣椒的花朵数增加了42.1%,坐果率85.2%,其坐果率相比对比例组具有显著的提高。使用了本发明液体肥料的辣椒单个鲜果重也增加了46.6%,实现亩产量增长两倍多,效果非常可观。然而,该液体肥料对小番茄的花朵数量以及坐果率的促进效果都没有起到实质的作用,对小番茄的保果率、亩产量和果实品质增加仅有较为小的作用。本发明的液体肥料对辣椒的保花保果具有十分显著的效果,对不同品种的蔬果的保花保果具有较高的选择性。本发明提供的链霉菌属菌株“TY-001#”,该菌株能够适应高渗透压下通气发酵培养。具体实施方式以下结合具体实施例来进一步说明本发明,但实施例并不对本发明做任何形式的限定。除非特别说明,本发明采用的试剂、方法和设备为本
技术领域
常规试剂、方法和设备。除非特别说明,以下实施例所用试剂和材料均为市购。实施例1链霉菌属菌株(Streptomyces)的分离与鉴定1.实验材料和条件(1)在湖南省郴州市某地采集到的土壤样品。(2)液体培养基每升组分如下:牛肉膏3.0g、蛋白胨10.0g、氯化钠5.0g,水定容至1升,pH为7.5。固体培养基每升组分如下:牛肉膏3.0g、蛋白胨10.0g、氯化钠5.0g、琼脂15~25g,水定容至1升,pH为7.5。培养基分装,高压灭菌锅灭菌(121℃,30min)。(3)无菌操作条件:所有器皿和用具均须经高压灭菌锅灭菌(121℃,30min),接种等操作均在超净工作台内进行。(4)菌株培养条件:置于25±1℃光照恒温箱(14L:10D)中培养,待菌落形成后,转移到PDA斜面,再转入5℃冰箱内保存。2.菌株分离与筛选(1)从湖南省郴州市某地的土壤样品中分离获得一株链霉菌属菌株T0。(2)将分离得到的链霉菌属菌株T0接入固体培养基中斜面继代培养,再转入5℃冰箱内保存。(3)将继代培养的菌株T0于液体培养基中,在振荡摇床上220转/分钟,25℃条件下培养5天。(4)培养5天后的T0液体菌,放置于20瓦紫外线灯25cm处照射2小时。(5)将照射后的T0液体菌接入固体斜面培养基中25℃下培养5天,然后挑出长得最好的存活菌落接入固体培养基继代培养。(6)重复若干遍步骤(2)~(5)的过程循环。在每一遍重复过程循环中,固体培养基和液体培养基中的氯化钠用量都增加1克,直至固体培养基和液体培养基中的氯化钠用量达到25克。将最终存活的健壮菌株进行继代培养,再转入5℃冰箱内保存。(7)将以上筛选出的耐高渗透压菌株T0,进行发酵生产试验。经7天25℃敞开有氧发酵后,测定发酵液中氨基态氮(按甲醛滴定法测定氨基氮标准检测),挑选出氨基态氮含量(≥0.7mg/L)最高的菌株作为最终生产用菌株,命名“TY-001#”。发酵生产试验所用的培养基如下:取大豆100g磨成豆浆过滤,弃豆渣;白砂糖100g,定容至1000mL,pH为7.5。3.菌株“TY-001#”的鉴定(1)形态学鉴定形态特征为:菌落呈圆形,乳白色,边缘光滑,表明有炼乳状光泽;孢子革兰氏染色呈阳性。形态学鉴定显示,该菌株属于链霉菌属。综上所述,菌株“TY-001#”为链霉菌属,于2017年3月24日保藏于广东省微生物菌种保藏中心,其保藏编号为GDMCCNo.:60152,保藏地址是中国广州市先烈中路100号省微生物所实验楼五楼。实施例2一种防止辣椒落花、落果的液体肥料的制备和应用一种防止辣椒落花、落果的液体肥料的制备方法包括以下步骤:S1.制备培养基:取1000g大豆浸泡10h后,放入磨浆机中磨成豆浆,滤去豆渣,将滤液置于干净的发酵桶中,然后往滤液中加入白砂糖后,加水定容至培养基中糖的浓度100g/L,pH为7.5;S2.接种:取链霉菌属菌株“TY-001#”的液体菌种,接种到培养基中,搅拌均匀;液体菌种中每毫升有2亿个活菌;液体菌种与培养基的比例为165g:250L;S3.发酵:开启氧气泵,在发酵过程中往发酵桶中持续通入氧气,并根据发酵桶中单独浆液气泡情况,加入适量的消泡剂。发酵桶用透气膜覆盖,以免落入杂物,于25℃下持续发酵7天后,得到发酵液;S4.终止发酵:将发酵液灌装密闭静置15天,得到活性液体肥基底制剂。S5.液体肥料的配置:往1000份活性液体肥基底制剂中添加芸苔素0.01份、赤霉素0.01份、壳寡糖0.01份、硝酸铵钙68份、氨基酸1份、磷酸二氢钾15份、氯化钾40份、硫酸镁9份、硼砂1份、微量元素2份得到液体肥料;所得液体肥料中总氮含量≥2.5mg/g,氨基氮含量≥0.4mg/g,有机质含量≥130g/L。实施例3一种防止辣椒落花、落果的液体肥料的制备和应用一种防止辣椒落花、落果的液体肥料的制备方法包括以下步骤:S1.制备培养基:取1000g大豆浸泡10h后,放入磨浆机中磨成豆浆,滤去豆渣,将滤液置于干净的发酵桶中,然后往滤液中加入白砂糖后,加水定容至培养基中糖的浓度100g/L,pH为7.5;S2.接种:取链霉菌属菌株“TY-001#”的液体菌种,接种到培养基中,搅拌均匀;液体菌种中每毫升有2亿个活菌;液体菌种与培养基的比例为165g:250L;S3.发酵:开启氧气泵,在发酵过程中往发酵桶中持续通入氧气,并根据发酵桶中单独浆液气泡情况,加入适量的消泡剂。发酵桶用透气膜覆盖,以免落入杂物,于25℃下持续发酵7天后,得到发酵液;S4.终止发酵:将发酵液灌装密闭静置15天,得到活性液体肥基底制剂。S5.液体肥料的配置:往1000份活性液体肥基底制剂中添加芸苔素0.1份、赤霉素0.1份、壳寡糖0.1份、硝酸铵钙78份、氨基酸3份、磷酸二氢钾18份、氯化钾42份、硫酸镁11份、硼砂2份、微量元素5份得到液体肥料;所得液体肥料中总氮含量≥2.5mg/g,氨基氮含量≥0.4mg/g,有机质含量≥130g/L。实施例4一种防止辣椒落花、落果的液体肥料的制备和应用一种防止辣椒落花、落果的液体肥料的制备方法包括以下步骤:S1.制备培养基:取1000g大豆浸泡10h后,放入磨浆机中磨成豆浆,滤去豆渣,将滤液置于干净的发酵桶中,然后往滤液中加入白砂糖后,加水定容至培养基中糖的浓度100g/L,pH为7.5;S2.接种:取链霉菌属菌株“TY-001#”的液体菌种,接种到培养基中,搅拌均匀;液体菌种中每毫升有2亿个活菌;液体菌种与培养基的比例为165g:250L;S3.发酵:开启氧气泵,在发酵过程中往发酵桶中持续通入氧气,并根据发酵桶中单独浆液气泡情况,加入适量的消泡剂。发酵桶用透气膜覆盖,以免落入杂物,于25℃下持续发酵7天后,得到发酵液;S4.终止发酵:将发酵液灌装密闭静置15天,得到活性液体肥基底制剂。S5.液体肥料的配置:往1000份活性液体肥基底制剂中添加芸苔素0.3份、赤霉素1份、壳寡糖0.8份、硝酸铵钙81份、氨基酸6份、磷酸二氢钾21份、氯化钾45份、硫酸镁15份、硼砂3份、微量元素8份得到液体肥料;所得液体肥料中总氮含量≥2.5mg/g,氨基氮含量≥0.4mg/g,有机质含量≥130g/L。实施例5一种防止辣椒落花、落果的液体肥料的制备和应用一种防止辣椒落花、落果的液体肥料的制备方法包括以下步骤:S1.制备培养基:取1000g大豆浸泡10h后,放入磨浆机中磨成豆浆,滤去豆渣,将滤液置于干净的发酵桶中,然后往滤液中加入白砂糖后,加水定容至培养基中糖的浓度100g/L,pH为7.5;S2.接种:取链霉菌属菌株“TY-001#”的液体菌种,接种到培养基中,搅拌均匀;液体菌种中每毫升有2亿个活菌;液体菌种与培养基的比例为165g:250L;S3.发酵:开启氧气泵,在发酵过程中往发酵桶中持续通入氧气,并根据发酵桶中单独浆液气泡情况,加入适量的消泡剂。发酵桶用透气膜覆盖,以免落入杂物,于25℃下持续发酵7天后,得到发酵液;S4.终止发酵:将发酵液灌装密闭静置15天,得到活性液体肥基底制剂。S5.液体肥料的配置:往1000份活性液体肥基底制剂中添加芸苔素3份、赤霉素5份、壳寡糖3份、硝酸铵钙85份、氨基酸12份、磷酸二氢钾26份、氯化钾52份、硫酸镁21份、硼砂10份、微量元素12份得到液体肥料;所得液体肥料中总氮含量≥2.5mg/g,氨基氮含量≥0.4mg/g,有机质含量≥130g/L。对比例1一种防止辣椒落花、落果的液体肥料的制备和应用一种防止辣椒落花、落果的液体肥料的制备方法包括以下步骤:S1.制备培养基:取1000g大豆浸泡10h后,放入磨浆机中磨成豆浆,滤去豆渣,将滤液置于干净的发酵桶中,然后往滤液中加入白砂糖后,加水定容至培养基中糖的浓度100g/L,pH为7.5;S2.发酵:开启氧气泵,在发酵过程中往发酵桶中持续通入氧气,并根据发酵桶中单独浆液气泡情况,加入适量的消泡剂。发酵桶用透气膜覆盖,以免落入杂物,于25℃下持续发酵7天后,得到发酵液;S3.终止发酵:将发酵液灌装密闭静置15天,得到活性液体肥基底制剂。S4.液体肥料的配置:往1000份活性液体肥基底制剂中添加芸苔素0.3份、赤霉素1份、壳寡糖0.8份、硝酸铵钙81份、磷酸二氢钾60份、硫酸镁15份、硼砂3份、微量元素8份得到液体肥料。防止辣椒落花、落果的液体肥料的应用效果评价:液体肥料能快速补充辣椒生长所需的养分,促进辣椒生长。为验证本发明制备的液体肥料在辣椒上大面积示范应用的实际效果,申请人选择在美人椒上进行了试验示范。1材料与方法1.1供试地点1设在资兴市某美人椒基地内,试验地面积5亩,土壤肥力水平较均匀。供试地点2设在建宁市某小番茄基地内,试验地面积5亩,土壤肥力水平较均匀。1.2供试作物1美人椒,植株行距0.6m*0.6m,长势中庸且一致。供试作物2小番茄,植株行距0.6m*0.6m,长势中庸且一致。1.3供试肥料为实施例2~5制得的促进辣椒花芽发育的液体肥料,产品剂型为液体。1.4每个供试地点均进行2个试验处理:①实验组:种植后每个月浇施一次供试肥料,每次500mL/亩,稀释200倍。②对比例组:每亩每次以同实验组等量的对比例1制备的化肥同时期进行,其他施肥措施同处理①。实验组和对比例组均按当地常规栽培技术进行管理。试验各处理以每亩为小区,每个处理随机选取1株植株,重复3次,管理一致,观察株体生长情况,统计花果平均值,测定保花保果状况。2结果与分析2.1不同处理对坐果率的影响由表1可知,本实施例2~5制备的液体肥料对美人椒的花朵数相对对比例组增加了42.1%,坐果率达85.2%,相对对比例组增加了38.8%,具有显著的提高。然而,该液体肥料对小番茄的花朵数量以及坐果率的促进效果都没有起到实质的作用。可见,本发明的液体肥料对不同蔬果的保花保果具有选择性,对辣椒的保花保果作用最为显著。表1不同果蔬不同处理的坐果率结果处理果穗花朵数/朵果穗坐果数/个坐果率/%美人椒实验组816985.2美人椒对比例组573561.4小番茄实验组645078.1小番茄对比例组614980.32.2对亩产量的影响统计每亩株数,随机10点取样,统计挂果数,称鲜果重,计算挂果数、单个鲜果重的平均值,测算理论亩产量。经测算,每亩栽种1800株植株,分别抽取10株植株挂果数、单个鲜果均重、果穗数和亩产量的平均值如表2。由表2可知,使用了该液体肥料的美人椒单个鲜果重相比对比例组增加了21.6%,实现亩产量增长两倍多,效果非常可观。然而,该液体肥料对小番茄的保果率和亩产量增加仅有较为小的作用。可见,本发明的液体肥料对辣椒的保花保果具有十分显著的效果,对不同品种的蔬果具有较高的选择性。表2不同果蔬不同处理的结果情况及亩产量处理果穗挂果数/个鲜果均重/g亩产量/kg美人椒实验组6214.11573.6美人椒对比例组3011.6626.4小番茄实验组4315.81166.0小番茄对比例组4115.61151.3以上所述仅为本发明的优选实施例,并不用于限制本发明,对于本领域的技术人员来说,本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的包含范围之内。当前第1页1 2 3 
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